生物化學科Biochemistry080006
PMCA 技術在漸凍症(ALS)致病蛋白TDP-43 纖維之高靈敏度偵測開發及應用 Taiwan
TDP-43是漸凍症(ALS)及額顳葉失智症(FTLD)等神經退化性疾病的致病蛋白,在患者 腦內會有類澱粉蛋白TDP-43 錯誤折疊而產生蛋白質堆積,不同堆積階段依序為單體(monomer)、多倍體(oligomer)、纖維(fiber)。其中纖維為許多神經退行性疾病的病理標誌,且相較於已有的TDP-43 oligomer 單株抗體,目前沒有對TDP-43纖維抗體的研究,因此本實驗利用單株抗體技術製造出對應TDP-43 纖維的不同抗體進行純化濃縮,找出對TDP-43 fiber 專一性最高、結合效率及結合率皆最好抗體,以作為檢測漸凍症患者血液中TDP-43 fiber 的生物標誌(Biomarker)。 同時為了增加偵測的靈敏度,本實驗成功創新利用PMCA ( protein misfolding cyclic amplification) 技術快速放大纖維的數量以提高檢測準確度,搭配高專一性、高結合效率的編 號3-2 自製抗體作為Biomarker,只需五個小時便可以將極少量纖維的訊號約提高至原先的17倍,具有極高靈敏性可以準確辨認出有無TDP-43 纖維的樣本差別。